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新手如果学好液相色谱

液相色谱(简称HPLC)是现代分析化学、环境、生物、医药等领域最常用的分离分析技术之一。

    学习液相色谱对于新手来说,可以通过以下几个步骤来提高自己的技能和理解:

  • 了解液相色谱的基本组成与原理液相色谱仪主要由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。其工作原理是通过储液器中的流动相在高压泵的作用下打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,并被载入色谱柱(固定相)内。由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,经过反复多次的吸附-解吸过程,各组分在移动速度上产生较大差别,从而被分离成单个组分依次从柱内流出。通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据最终以图谱形式打印出来

  • 掌握基本操作步骤与要点

o  试剂准备:据实验需求,准备好所需的溶剂、标准样品和待测样品,确保试剂的纯度和有效性。

o  系统准备:打开色谱仪电源,连接相关软件和色谱仪,安装色谱柱并正确连接流体管道,打开流体控制器调节气压。

o  样品预处理:将样品溶解于适当的溶剂中并过滤以去除杂质,进行样品前处理如固相萃取、离子交换或凝胶过滤等以提高纯度和分离效果。

o  样品注入与运行实验:利用注射器将准备好的样品注入色谱柱中,设置适当的注射量和流速,调节检测器参数以优化检测效果,启动液相色谱仪并开始运行实验。

o  数据分析与结果处理:实验完成后进行数据分析,计算各组分的含量或比例,确保数据记录和分析结果的准确性

  • 注意流动相的管理和处理纯水应现取现用,乙腈需过滤除去聚合物杂质,甲醇可直接使用。预配流动相需过滤并超声脱气,确保流动相纯净无气泡。更换流动相时要充分排空,留意压力变化,并及时更换过滤白头

  • 色谱柱的安装与清洗遵循标准的安装顺序逐级排放气泡和仪器内存留的洗液,避免气泡混入。试验后根据流动相的性质进行科学的清洗和保存,避免盲目操作导致色谱柱性能下降

  • 废液处理与数据管理定期检查废液桶容量,确保有足够空间容纳废液。设定合适的数据文件存放路径,并在运行结束后关闭灯源待机

通过上述步骤,新手可以系统地学习和掌握液相色谱的操作技巧和注意事项,从而确保实验的准确性和仪器的稳定性。


来源:仪器信息网,id:Ins_baeeaeb7


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